Результаты поиска потегумикробиология

Дополнительные фильтры
Теги:
микробиологияновый тег
Автор поста
Рейтинг поста:
-∞050100200300400+
Найдено: 17
Сортировка:

Планировка микробиологической лаборатории.

Приветствую! Сегодня расскажу, что и как располагается в лаборатории.

Начнем с того, что микробиологическая лаборатория - это закрытое подразделение. И никто, кроме сотрудников лаборатории не должен туда входить. А если кто-то и входит, то крайне редко и под неусыпным присмотром. И это просто чудесно! К примеру взять клиническую лабораторию, там постоянно всякие долбаебы шастают, бабки неадекаатные. Мы в танке. Входная дверь всегда должна быть закрыта на ключ или на кодовый замок. Материал принимается через приёмное окно в двери. На двери должен быть знак "биологическая опасность". 

Кстати, знак джойреактора основан на нашем знаке. Нас многое роднит))

Теперь перейдем к планировке. Лаборатория делится на "чистую" и "заразную" зоны. В заразной идёт работа с культурой.

Итак. В лабораторию мы должны придти уже без верхней одежды. В гардеробе переодевается, надеваем брюки, сорочку, халат. Закрытую обувь. Типа чешек. Я всегда был единственным мужчиной в коллективе, так что тут возникали трудности. Гардероб один, но потом приработались, всем уже как то похеру, закрылся дверцей шкафчика и переодевайся. 

Далее комната хранения сухих сред. Я рассказывал о готовых средах-полуфабрикатах. Хранятся они в обычных шкафах. При контроле влажности. Для этого есть специальный прибор. 

Психометр
ê
.ВЛАЖН
■%
ГИГРОМЬТР ПСИХРОМ1ТРИЧССКИЙ
ВИТ - 2
IF м	»*KK'i HOiaMhk» tlPMOMtlIOl :									
										
• i	101 Si.Oi.V 1*114 04 SSOSSI 0 '									
	OTHOCrfllüSHA* *>1АЖ*1СТЬ V.									
•»	'»О’ёППГТФТГИ							SI	я	
л	♦0	IS	11	1»	li	fl	fl	S4	ss	S1 41
и	H	II	1}	It	1)	14	44	«1	SI	Si 4|
}j

Внизу один ртутный столбик обернут марлей и погружен в дистиллированную воду. Другой столбик всегда сухой. При измерении от большего показателя вычитаем меньшее. По таблице определяем влажность. Такие приборы должны быть во всех помещениях лаборатории.

В автоклавной стерилизуют уже чистую посуду, инструменты и питательные среды.

В моечной посуда после дезинфекции выдерживается в т.н. "моющим комплексе". Это стиральный порошок + моющий гель + перекись водорода. Затем все это моется, ополаскиваетсч в проточной воде, затем в дистиллированной воде, сушится. Часто в моечной стоят сухо-жаровые шкафы. В них можно стерилизовать посуду и инструменты.

В средоварочной идёт приготовление сред. Помимо плиты там должнен быть стол для взвешивания сухих сред и разливания готовой среды по ёмкостям. Я забыл его нарисовать.

Рабочий кабинет. Столы, где сидят лаборанты и врачи и занимаются ебучей писаниной. Часто есть компьютеры. Но наличие электронной базы очень часто не освобождает от бумажных журналов. Потому что "А вдруг компюхтеры сломаются, сбой и все данные пропадут!". То, что создание резервных копий это дело отдела ТО объяснить бесполезно. Поэтому делаем двойную работу. Компьютеры облегчают работу, говорили они. Думаю, многим эта ситуация знакома. 

Теперь идём в заразную зону. Сперва нужно пройти в тамбур, поменять халат и обувь. Вход в заразную зону посторонним запрещён. Исключение - всякие комиссии, ремонтные работы и т.п. ситуации. Допуск посторонних только под присмотром начальства. 

Теперь стерильный бокс. Там ещё один тамбур. Надеваем одноразовые бахилы

И стерильный халат.

Маску, стерильные перчатки и можно заходить в бокс. Разумеется, перед этим его кварцуют.

В термостатной стоят термостаты, там инкубируются среды с живой культурой. Так же в термостатной делают окраску мазков. 

В автоклавной идёт уничтожение культуры. В автоклаве или же в микроволновке. 

В общих чертах рассказал, как устроена лаборатория.


Полужидкие и плотные питательные среды.

Всем привет! Продолжим тему питательных сред.

Полужидкие питательные среды.

Позволяют ограничено культивировать анаэробы. По моим наблюдениям, этот тип сред не особо популярен. Единственная полужидкая среда, с которой мне довелось поработать - это Тиогликолевая среда. При приготовлении имеет довольно резкий запах и немного желеподобную консистенцию. Является универсальной средой, т.е. на в ней растут большинство микроорганизмов. Используется для контроля стерильности. Рост, как и на мясо-пептонном бульоне может проявляться по-разному. Помутнение, осадок, взвесь и т.д.

Тиогликолевая среда.

,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост

Плотные питательные среды. 

Это питательные среды с высоким содержанием агар-агара. Разливаются в чашки Петри или же в пробирки. 

Чашки Петри - это грубо говоря, два блюдца с высокими краями. Крышка больше по диаметру. Среда заливается  в чашечку меньшего диаметра. Чашка Петри со средой всегда хранится крышкой вниз. Так ее всегда можно поднять и чашечка со средой силой тяжести будет держаться на крышке. Изготавливают чашки Петри из стекла и пластика. Стеклянные чашки Петри после использования дезинфицируются, моются, стерилизуются. Пластиковые чашки Петри поставляются стерильными, в герметичной упаковке. Одноразовые. После использования обрабатываются в автоклаве или же в микроволновке и утилизируются. 

Стеклянная чашка Петри.

Пластиковая чашка Петри.

1. Мясо-пептонный агар. По сути, это мясо-пептонный бульон с добавлением агар-агара. Универсальная питательная среда. 
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост

2. Желточно-солевой агар. Элективная питательная среда для выделения стафилококков. К стерильному Мяcо-пептонному агару в асептических условиях добавляется желток куриного яйца. Выглядит как мясо-пептонный агар, только немного с более желтым оттенком. 

3. Кровяной агар. Среда с добавлением крови животных или же человека. Человеческая кровь допускается к использованию, но не рекомендуется, т.к. в крови людей могут быть антитела к микроорганизмам. Служит элективной средой для стрептококков, а так же позволяет диагностировать гемолиз.

Пример гемолиза на кровяном агаре:
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост

4. Среда Эндо. Дифференциально-диагностическая среда для кишечных бактерий. На этой среде кишечные палочки окрашиваются в специфический цвет. 
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост

5. Питательный агар в пробирке столбиком. Используется для посева анаэробов. Петлей для посева материал помещают в глубь среды. Сверху наливают слой вазелинового масла. Таким образом создаются условия без доступа воздуха.
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост

6. Скошенный столбик агара. Мы его использовали для диагностики кишечной бактерии рода Протей. На скошенном агаре эта бактерия образует характерный "ползучий рост".

На этом пока всё. В следующий раз продолжу знакомить вас с микробиологической лабораторией. 

Жидкие питательные среды.

Приветствую всех реакторчан! Сегодня хочу немного рассказать о жидких питательных средах. 

 1. Мясо-пептонный бульон. Это основная среда, т.е. там растет большинство микроорганизмов. Рост проявляется появлением помутнения, осадка, взвеси, хлопьев и т.д. Среда не позволяет получить выделенную культуру, т.е. можно говорить только о наличии каких-либо микроорганизмов. Если идет проверка стерильности, то этого вполне достаточно. При необходимости с мясо-пептонного бульона идет пересев на плотные питательные среды. 
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,песочница


2. Бульон Сабуро. Это элективная среда, т.е. она создана для выращивания определенных микроорганизмов. В данном случае плесневых грибов и дрожжей. В среду добавляется антибиотик, который подавляет рост других микроорганизмов. Внешний вид очень похож на мясо-пептонный агар, поэтому фото не прикрепляю. 
3. Среда Кесслера. Это Дифференциально-диагностическая среда, т.е. она способствует определению вида и ли группы видов по ферментативной активности. В данном случае - бактерий группы кишечной палочки. При расщеплении лактозы образуется газообразование. в среде его можно обнаружить следующим способом: После приготовления среды, в пробирки помещают небольшие колбочки горлышком вниз. При автоклавировании давление выдавливает из них воздух и колбочки полностью погружаются. Если во время роста микроорганизмы вызывают газообразование, газ скапливается внутри колбочек и образуется пузырек. При сильном газообразовании колбочки могут всплыть. 
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,песочница
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,песочница
Кто-то утверждает, что можно определить газообразование без колбочек, но это шаманство. 

4. SDS-бульон. Так же реагирует на расщепление лактозы. Тут идет изменение цвета с зеленого на желтый за счет PH-индикатора. Так же может реагировать на моющие средства. Например, если после мойки посуды или оборудования, баков в пищевом производстве поверхность плохо промыли - среда это покажет. Причем изменение цвета идет моментально. 

,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,песочница

5. Существуют т.н. транспортные среды. Это среды, куда помещают мазки, материал, чтобы хранить их до посева. Мы использовали обычный физиологический раствор. 9 гр. соли на 1 литр дистиллированной воды. Стерилизуется. Мазки и материал в физ. растворе храниться до посева в холодильнике. 

На сегодня у меня всё. 

Питательные среды.

Питательные среды это то, на чем растут микроорганизмы. Существуют жидкие, полужидкие и плотные питательные среды. Однако, здравствуйте.

Обычно питательные среды поставляют в лаборатории в виде порошка-полуфабриката. Остаётся его только приготовить. Как готовят? В простой кастрюле, на плите. Можно в химическом стаканчике, колбе, если объем небольшой. Наливают дистиллированную воду и растворяют, помешивая. Похоже на приготовление киселя. На банках со средой обязательно есть инструкция. Какое соотношение порошка/воды, растворять в холодной или кипящей, сколько кипятить и как фильтровать, если в фильтрации есть необходимость. Так же на упаковке указан способ стерилизации среды. При приготовлении сред возникает специфический запах. Кто-то его не может переносить. Мне нормально. Даже нравится. Единственное, от чего меня толкнуло - это гидролизат кильки. 


Многие среды можно готовить не из полуфабрикатов, а с нуля. Но это ебаная алхимия и сейчас таким в лабораториях не занимаются. Этот вариант только на случай серьезных перебоев с поставкой сухих полуфабрикатов.

Жидкие питательные среды. Разливаются в пробирки, иногда в колбы. 

Мясо-пептонный бульон.


Да, именно мясной. Пожрать микроорганизмы большие любители. Поэтому в состав сред входят мясная мука (реже гидролизат кильки), различные белки-углеводы и прочие ништяки. 

Полужидкие питательные среды. Отличаются небольшим добавлением агар-агара. Агар-агар - это вещество, получаемое из водорослей. Аналог желатина. Сам желатин тоже иногда используется в средах, но некоторые микроорганизмы его расщипляют, поэтому предпочтение отдается агару. Добавление агара позволяет ограничено выращивать анаэробы.

Тиогликолевая среда.

Плотные питательные среды. Среды с высоким содержанием агар-агара. После варки их разливают в ёмкости (колбы, флаконы, бутили), стерилизуют по инструкции, а затем в условиях асептики разливают в стерильные чашки Петри или же в пробирки. Для микроорганизмов важно наличие питательных веществ, а так же достаточной влаги для жизни. Поэтому разливать среду нужно толщиной в 3-4 мм во избежании высыхания среды. 

Мясо-пептонный агар

Скошенный столбик плотной среды.

В общих чертах прошёлся по питательным средам.

Оборудование в микробиологической лаборатории.

Всем привет! Сегодня расскажу, на каком оборудовании мы работаем. Начну по стерилизаторов.

1.Паровой стерилизатор, он же автоклав. Стерилизует паром под давлением. Основные режимы - 1,1атм, 120°С и 2 атм давления, 132°С. Сейчас практически все автоматические, но бывают и не автоматические. Работать с любыми автоклавам имеет право только специально обученный персонал. У меня такой допуск был. Всем остальным к автоклавам прикасаться запрещено. Они потенциально опасны. Если рванёт при 2-х атм - мало не покажется! Был случай, когда одна девушка-лаборант мимо проходила и перекрыла вентиль трубы. К счастью, вовремя заметили. Спросили: "Зачем перекрывать то?". "Я иду, а он шипит. Вот и решила перекрыть, чтобы не шипел". Дура.
2. Сухо-жаровой шкаф. Стерилизует сухим воздухом при 180°С. Специального допуска для работы не требуется. Обычно там стерилизуют металлические инструменты, стеклянную посуду. Оберточная бумага, ватно-марлевые пробки там темнеют, но не горят. Разумеется, нельзя помешать туда резиновые изделия, так же горят пробки из пробкового дерева (об этом я писал ранее). Нельзя класть на работающий шкаф посторонние предметы, особенно горючие - полотенца, марлю, ветошь и т.д. Разумеется, нельзя оставлять его без присмотра, включать на ночь.
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост,песочница
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост,песочница

3. Ультрафиолетовые лампы. Используются для стерилизации помещений. У них ограниченный ресурс. Поэтому ведётся специальный журнал, где фиксируют время работы каждой лампы. При израсходования ресурса лампу необходимо менять. 
4. Микроволновая печь. Используется для разогрева сред, а так же для уничтожения культур микроорганизмов. Фото не прикрепляю, думаю, вы все знаете, как она выглядит.
5. Ламинарный шкаф. Это место, где производятся посевы. Оснащен вентиляцией, собственными у/ф лампами, некоторые имеют несколько режимов работы. Такие шкафы есть не во всех лабораториях. Работа в ламинарном шкафу допускается только в средствах индивидуальной защиты.
6. Термостат. В нем поддерживается постоянная температура для инкубирования микроорганизмов. Чаще всего это 37°С, но иногда выставляют иную температуру.
7. Холодильники. В них хранятся приготовленные среды, а так же смывы до посевов. Разумеется, смывы и среды в разных холодильниках. 
8. Электрические плиты. Используются для приготовления сред. 
9. Анаэростат. Прибор для выращивания анаэробов. Это микроорганизмы, которые живут без доступа воздуха. В цилиндр помещают чашки Петри с посевами, затем внутри создаётся вакуум. Он есть не во всех лабораториях. 
,лаборатория,наука,сделал сам,нарисовал сам, сфоткал сам, написал сам, придумал сам, перевел сам,микробиология,длиннопост,песочница

10. Аспиратор для посева воздуха. Внутрь помещают открытую чашку Петри со средой, затем прибор засасывает определенный объем воздуха. Очень удобен. 
Вот и все. Вроде бы ничего не забыл.

Как бактерии отличают свою ДНК от вирусной

  Молекулярный мусор помогает бактериальной клетке запоминать последовательности из вирусных генов, чтобы впоследствии использовать их для отражения вирусной атаки.
,Реактор познавательный,галилео, реактор познавательный, интересности, интересное, #галилео,разное,генетика,микробиология,наука
  Мы с детства помним картинку из школьного учебника: вирус-бактериофаг с «головой»-многогранником, стебельчатым «туловищем» и несколькими «ножками», похожий на какой-то загадочный аппарат, садится на бактериальную клетку и впрыскивает в неё свой геном. Последствия операции – в клетке появляются новые вирусные частицы (всё те же «головы», «туловища» и «ножки»), которые в конце концов разрушают бактерию. Она кажется нам совершенно беззащитной перед вирусной атакой но было бы действительно странно, если бы бактериальные клетки не обзавелись противовирусной «системой сдерживания».
,Реактор познавательный,галилео, реактор познавательный, интересности, интересное, #галилео,разное,генетика,микробиология,наука
(Бактериофаги на кишечной палочке.)

  Такие системы действительно есть, и одну из них, под названием CRISPR/Cas, часто называют бактериальным иммунитетом – потому что с её помощью бактерия может запоминать информацию о вирусах и использовать её для защиты от будущих инфекций. То есть здесь у нас есть аналог иммунной памяти многоклеточных животных. Работает она так: в бактериальной хромосоме есть участок CRISPR, сокращённо от Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats – короткие палиндромные повторы в ДНК, регулярно расположенные группами. Повторы перемежаются другими последовательностями, которые происходят из генома бактериофагов. Это и есть «иммунная память». Когда в клетке появляется чужеродная ДНК, бактерия снимает РНК-копию с «запомненной» последовательности и сравнивает её с пришельцем. Если совпадение есть, значит, чужую ДНК нужно разрушить. Разумеется, вся процедура осуществляется с помощью специальных белковых комплексов.
Virus DNA
O
Plasmid
DNA
® Acquisition
Leader 10 987654321 cas locus	CRISPR	array
@ Expression
\7
,9>
_JUU1_T( it fl Ti Ti
O -	Pre-crRNA
Cas proteins
*
crRNA
Plasmid DNA cleaved
fr
(?) Interference
Virus DNA cleaved,Реактор познавательный,галилео, реактор познавательный,
  Любая защитная система должна отличать своих от чужих. Наш иммунитет не должен атаковать здоровые клетки тела, соответственно, бактериальная система CRISPR/Cas должна как-то чувствовать разницу между ДНК вируса и ДНК самой бактерии ещё на стадии «запоминания». На самом деле, у бактерий есть и «аутоиммунные заболевания», когда система противовирусной защиты начинает повреждать их собственную ДНК, однако такие случаи весьма редки. То есть механизм различения «свой-чужой» всё же работает.

  Как именно он работает, выясняли исследователи из Института Вейцмана и Тель-Авивского университета. Они ввели в бактериальную клетку плазмиду, которая имитировала вирус. 
(Плазмидами называют небольшие кольцевые молекулы ДНК, существующие у бактерий наравне с главной большой хромосомой; они обладают значительной самостоятельностью и могут удваиваться вне зависимости от репликации хромосомы, которая привязана к клеточному делению.)
,Реактор познавательный,галилео, реактор познавательный, интересности, интересное, #галилео,разное,генетика,микробиология,наука
 С помощью белков Cas1 и Cas2 (которые входят в систему CRISPR/Cas) бактерия встраивала ДНК плазмиды в хромосому, причём именно туда, где должна храниться информация о вирусной инфекции. 

  Оказалось, как пишут Ротем Сорек (Rotem Sorek) и его коллеги в Nature, система CRISPR и её белки Cas1 и Cas2 распознавали именно ту ДНК, которая слишком активно удваивалась. А ведь это вирусная стратегия: любой ценой создать как можно больше копий своего генома. Иными словами, если молекулярные компоненты CRISPR/Cas чувствовали ДНК, которая быстро размножается, то система делала вывод, что в клетку проник вирус и его нужно запомнить. Но как именно происходило узнавание?

  При репликации ДНК в ней неизбежно случаются повреждения, разрывы, которые тут же ремонтируются репарационными машинами. Репарирующие ферменты сначала обрабатывают место повреждения так, чтобы его удобно было ремонтировать, а потом уже собственно ликвидируют разрыв. Вот в процессе подготовки к ремонту от ДНК и остаются фрагменты, которые «иммунная система» бактерий может подхватить и вставить в свою «библиотеку вирусов». С другой стороны, в бактериальной ДНК есть определённые сигнальные последовательности, которые говорят репарирующей машине, когда нужно прекратить улучшать место повреждения. Такие стоп-сигналы уменьшают количество ДНК-обрезков, которые может использовать система CRISPR/Cas. И – самое главное – таких стоп-сигналов много в ДНК бактерий, но почти нет в ДНК вирусов. То есть при ремонте вирусной ДНК молекулярного мусора образуется много, а при ремонте бактериальной ДНК – намного меньше. 
,Реактор познавательный,галилео, реактор познавательный, интересности, интересное, #галилео,разное,генетика,микробиология,наука
(Реплицирующаяся ДНК – репликационный пузырь образовался там, где идёт синтез второй копии молекулы.)

  Получается, что бактериальные клетки используют два самых обычных процесса, репликацию и репарацию, чтобы отличить свою ДНК от чужой; но, кроме того, у них есть ещё и маркеры – специальные нуклеотидные последовательности, которые помогают оптимизировать процедуру и сделать её более эффективной.

  Защитную систему CRISPR/Cas обнаружили всего несколько лет назад, и она мгновенно стала исследовательским «хитом». Дело не только в том, что, воздействуя на иммунитет вредных бактерий, мы можем подавить их рост с помощью бактериофагов, и тем самым уменьшить вероятность заболеваний. С помощью CRISPR/Cas, как оказалось, можно редактировать геномы животных – разумеется, для этого молекулярные составляющие системы программируются на распознавание участков в ДНК крысы или обезьяны. Год назад китайские специалисты из Нанкинского медицинского университета получили таким образом геномодифицированых макак-крабоедов, правда, модификацию осуществляли ещё на стадии эмбриона. Молекулярные инструменты «бактериального иммунитета» позволяют избавиться от вредных мутаций, заменять больной ген здоровым и т. д. Учитывая количество работ, посвящённых CRISPR/Cas, можно надеяться, что в скором времени редактирование генома человека, даже вполне взрослого, станет рутинной процедурой. 

Кирилл Стасевич

Nature: http://www.nature.com/nature/journal/vaop/ncurrent/fu..
Источник: http://www.nkj.ru/news/26203/
Здесь мы собираем самые интересные картинки, арты, комиксы, мемасики по теме (+17 постов - )